N-(5-氨基-1-羧基戊基)亚胺二乙酸三-T-丁酯置于三氟乙酸 Ethandithiol,三异丙基硅烷,苯酚体系中,化学反应 4.0H,反应生成N,N-双(羧甲基)-L-赖氨酸
参考文献:用于组氨酸标签蛋白的可切换识别的高亲和力接头
标题:用于组氨酸标签蛋白的可切换识别的高亲和力接头
摘要:我们渴望创建化学识别单元,以高亲和力和稳定性结合寡聚组氨酸标签,作为将光谱探针和其他功能元件选择性地连接到重组蛋白的工具.合成了几个包含 2-4 个次氮基三乙酸 (Nta) 部分的超分子实体,其中还包含一个氨基,荧光素作为灵敏的报告探针与之偶联.这些多价螯合剂头 (Mch)(称为 Bis-,Tris-和 Tetrakis-Nta)的特征在于它们与六组氨酸 (H6) 和十组氨酸 (H10) 标记目标的相互作用.通过分析尺寸排阻色谱观测到随着nta部分数量的增加,结合稳定性显着增加.通过等温滴定量热法测定的结合焓几乎随着螯合剂头和标签之间可能的配位键的数量增加而增加.然而,要获得完全相加的结合焓,需要寡聚组氨酸标签中大量过量的组氨酸.与单-Nta 相比,通过荧光去猝灭测量的 Mch/寡聚组氨酸复合物的解离动力学显示稳定性增加了 4 个数量级,并且对 Tris-Nta 达到了亚纳摩尔亲和力.随着
Doi:10.1021/ja050690C